Чита. Забайкальский медицинский вестник. 2001. № 1. С. 21-25.

Применение рекомбинантного интерлейкина-2 (Ронколейкина^®)
при комбинированном лечении больных раком гортани

В работе изучено влияние рекомбинантного ИЛ-2 (Ронколейкина^®) на течение послеоперационного периода у больных раком гортани и исследован феномен лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии в качестве теста для подбора индивидуальной дозировки Ронколейкина^® у больных раком гортани. Показано, что использование Ронколейкина^® у больных раком гортани приводит к более благоприятному течению послеоперационного периода, быстрому заживлению раны, уменьшает риск развития послеоперационных осложнений. При злокачественных опухолях гортани выявлено резкое снижение способности лимфоцитов к адгезии с тромбоцитами. Применение Ронколейкина^® при комбинированной терапии больных раком гортани усиливает адгезию лимфоцитов. Предложено проведение теста лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии в динамике для контроля над лечением Ронколейкином^®. Курс лечения проводят на протяжении всего периода высокого ответа лимфоцитов на препарат. Начинающееся снижение ответной реакции служит сигналом к прекращению курса цитокинотерапии.

В последнее десятилетие для лечения злокачественных новообразований внедряются лекарственные формы цитокинов. Для этих целей успешно себя зарекомендовали интерлейкины (ИЛ) 2, 12, интерфероны ?2а, ?2b и др. [4-11].

Наиболее привлекательным из всего семейства цитокинов в качестве регулятора естественной противоопухолевой защиты является интерлейкин-2. Молекулы ИЛ-2 являются ключевым звеном, определяющим развитие гуморального и клеточного иммунитета [4]. ИЛ-2 продуцируется Т-хелперами 1-го клона в ответ на антигенную стимуляцию. Он направленно влияет на рост, дифференцировку и активацию Т- и В-лимфоцитов, моноцитов, макрофагов, олигодендроглиальных клеток, эпидермальных клеток Лангерганса. От его присутствия зависит развитие цитолитической активности натуральных киллеров и цитотоксических Т-лимфоцитов. Интерлейкин-2 вызывает образование лимфокин-активированных киллеров и активирует опухоль-инфильтрирующие клетки. Эти обстоятельства позволяют цитокину эффективно влиять на многие звенья иммунитета при развитии злокачественных опухолей.

В последние годы стала очевидной эффективность использования рекомбинантного ИЛ-2, Ронколейкина^® – (Биотех, СПб) в комплексном лечении злокачественных новообразований. В качестве противоопухолевого средства Ронколейкин^® был апробирован в ведущих клиниках Москвы, Санкт-Петербурга, занимающихся проблемами онкологии. Однако до сих пор не существует принципов цитокинотерапии, и применение ИЛ-2 у больных при онкологических заболеваниях является малоизученным вопросом.

Целью настоящей работы явилось применение рекомбинантного интерлейкина-2 – Ронколейкина^® – в комплексном лечении больных раком гортани. При этом решались следующие задачи: 1) оценка течения послеоперационного периода у больных раком гортани; 2) исследование феномена лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии в качестве теста для подбора индивидуальной дозировки Ронколейкина^® у больных раком гортани.

Материалы и методы

В работе со здоровыми людьми и больными раком гортани соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинской Декларацией Всемирной Медицинской Ассоциации (World Medical Association Declaration of Helsinki) (1964).

Характеристика обследуемых больных. Исследования проводились у пациентов со стадиями опухолевого процесса Т2, Т3 и Т4. Наблюдаемые больные были распределены на три группы, идентичные по возрасту, полу, стадии и локализации опухолевого процесса и виду оперативного вмешательства.

В основную группу вошли 21 человек в возрасте от 43 до 66 лет (мужчин 17, женщин 4). Всем больным данной группы, наряду с базисным послеоперационным лечением (антибактериальным, противоотечным, дезинтоксикационным) и др. видами терапии, применяли Ронколейкин^®. Препарат назначали в разовой дозе 500000 ЕД в 400 мл 0,9% раствора хлорида натрия, медленно, внутривенно, капельно. Ронколейкин^® вводили за 2-3 дня до операции, спустя 2-3 суток после операции и повторно через 2-3 дня под контролем теста лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии.

В работе использован метод DBM (Double Blind Method), в соответствии с которым выделены две контрольные группы. В первой из них после операции проводилось медикаментозное лечение по обычной схеме. В этой группе наблюдалось 17 больных (14 мужчин и 3 женщины) в возрасте от 37 до 72 лет.

Пациентам второй контрольной группы применялось плацебо. В эту группу вошло 10 человек (2 женщины, 8 мужчин) в возрасте от 47 до 63 лет.

Полученные данные сравнивались с результатами исследований, проведенных на 60 здоровых донорах в возрасте от 18 до 60 лет.

Оценка лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии. Определение показателя лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии, относящегося к функциональным тестам оценки иммунокомпетентных клеток, проводили по методу, предложенному Ю.А. Витковским и соавт. [11]. Для этого свежую, гепаринизированную кровь обследуемых больных наслаивали на градиент урографин-фикол (плотность 1,077), центрифугировали и собирали интерфазное кольцо, содержащее клетки и кровяные пластинки, однократно промывали фосфатно-солевым буфером (pH 7,4). В камере Горяева подсчитывали число лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов на 100 клеток.

Результаты и обсуждение

Обнаружено, что в основной группе больных в клиническом отношении наблюдалось более благоприятное течение послеоперационного периода. Заживление наружных ран в 81% случаев осуществлялось первичным натяжением. В первой и второй контрольных группах заживление первичным натяжением наблюдалось в 47% и 40% случаев соответственно. Заживление наружной раны вторичным натяжением с образованием ларингеальных и фарингеальных свищей, которые самостоятельно закрывались к моменту выписки, зарегистрировано у 19% больных основной группы, 35% и 50% в первой и второй контрольных группах соответственно. В основной группе нагноение мягких тканей в области операционной раны с развалом и образованием стойких фаринго-, ларинго- и эзофагостом не выявлено ни в одном случае, в то время, как в первой и второй контрольных группах осложнения проявлялись в 18% и 10% случаев соответственно.

У больных основной группы, перенесших резекцию гортани (78%) заживление внутригортанных ран протекало более благоприятно, чем у аналогичных больных контрольной группы (43%). В частности, у первых на раневой поверхности определялся слой тонкого островчатого фибринозного налета, умеренный отек прилегающих тканей и не наблюдалось избыточного роста грануляций, значительно раньше регистрировалась эпителизация поверхности раны.

Сравнительная характеристика заживления послеоперационных ран в основной и контрольной группах больных позволяет прийти к заключению, что применение в послеоперационном периоде Ронколейкина^® улучшает заживление внутригортанных и наружных ран на шее и снижает вероятность развития местных гнойно-воспалительных осложнений.

Одной из наиболее серьезных задач послеоперационного лечения больных, перенесших операции на гортани, является предупреждение бронхо-легочных осложнений. Поэтому частота их регистрации и тяжесть служат критерием эффективности послеоперационной терапии. Осложнения со стороны трахеобронхиального дерева диагностированы в основной группе лишь у 9% больных (развился гнойный трахеобронхит). В то же время, в 1 и 2 контрольных группах подобные осложнения развивались в 41% и 40% случаев соответственно, а у 11% этих больных отмечался гнойно-некротический трахеобронхит с аспирационной пневмонией.

У всех больных основной группы, перенесших резекцию гортани, отмечалось сохранение дыхательной, голосообразующей функций и акта глотания. В контрольных группах благоприятный функциональный эффект наблюдался только у 71% больных.

Сроки послеоперационного лечения в основной группе составили, в среднем, 17 дней после резекции гортани и 27 дней после ларингэктомии. В 1 и 2 контрольных группах аналогичный срок составлял 25 и 23 дня после резекции гортани и 30 и 32 дня после ларингэктомии соответственно.

В нашей работе в качестве контроля над применением Ронколейкина^® у больных раком гортани использован тест лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии [2, 3]. Как установлено Ю.А. Витковским и соавт. [1, 12], в механизме лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии принимают участие молекулы межклеточной адгезии 1 (ICAM-1). Авторами показано, что в норме в общем пуле лимфоцитов находится до 13-15 % клеток, способных спонтанно образовывать коагрегаты с кровяными пластинками, и такими клетками являются Т-лимфоциты, несущие маркеры CD4+ (Т-хелперы). Выявлено, что стимуляция интерлейкином-2 повышает в общем пуле лимфоцитов количество коагрегатов, образованных не только Т-хелперами, но и натуральными киллерами (CD16+), участвующими в противоопухолевой защите. Феномен лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии может играть важную роль в миграции лимфоцитов через сосудистую стенку и, следовательно, влиять на формирование популяции опухоль-инфильтрирующих клеток.

Обнаружено, что под влиянием Ронколейкина^® у больных раком гортани более чем в 10 раз по сравнению с исходным уровнем повысилось содержание лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов. Более того, число «розеток» под влиянием Ронколейкина^® заметно превысило аналогичный показатель здоровых людей. В контрольных группах больных раком гортани, включая пациентов, получавших плацебо, изменений со стороны адгезивности лимфоцитов не выявлено.

Мы использовали тест лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии для динамического наблюдения больных, получавших Ронколейкин^®. В результате исследований установлено, что изменение лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии может служить критерием длительности цитокинотерапии. Показано, что повышение количества лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов длится на протяжении определенного времени, после чего следует снижение кривой адгезии. Начало снижения числа коагрегатов является сигналом для прекращения введения Ронколейкина^® больным раком гортани, поскольку, в этой точке достигнуто максимальное терапевтическое действие препарата и дальнейшее его введение не целесообразно.

Выводы

Использование Ронколейкина^® у больных раком гортани приводит к более благоприятному течению послеоперационного периода, быстрому заживлению раны, уменьшает риск развития послеоперационных осложнений.

При злокачественных опухолях гортани резко снижается способность лимфоцитов к адгезии с тромбоцитами. Применение Ронколейкина^® при комбинированной терапии больных раком гортани усиливает адгезию лимфоцитов.

Тест лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии позволяет контролировать использование Ронколейкина^® при злокачественных новообразованиях в гортани.

Литература